二氯乙酸对人肾癌细胞株A498侵袭及迁移的抑制作用研究

《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》[ISSN:2095-1221/CN:11-9310/R] 期数: 2020年第10卷第1期 栏目: 论著

作者:刘睿,于德新

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关键词:

页码:26

摘要:

【摘要】 目的 探讨二氯乙酸(DCA)对人肾癌细胞株A498侵袭及迁移的影响,并分析其机制。方法 取人肾癌细胞株A498培养,分为阴性对照 (等容积无菌生理盐水)组、DCA低、中、高 (5、10、20 mmol/L)剂量组,培养48 h。Transwell小室实验检测侵袭能力,细胞划痕实验检测迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应 (qRT-PCR)检测c-Jun氨基末端激酶 (JNK)、钙粘附蛋白E (E-cadherin)、N-钙粘蛋白 (N-cadherin)基因表达,Western blot检测蛋白表达及磷酸化JNK (p-JNK)。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果 与DCA高剂量组相比,DCA中、低剂量组、阴性对照组侵袭活性[(75.33 ± 10.09) 比 (167.89 ± 47.12)、(372.74 ± 50.06)、(530.26 ± 81.22)个/视野]、E-cadherin mRNA相对表达量 (1.52 ± 0.12比1.35 ± 0.11、1.02 ± 0.11、0.85 ± 0.12)、E-cadherin蛋白相对表达量 (1.32 ± 0.19 比0.89 ± 0.14、0.37 ± 0.08、0.13 ± 0.03)均降低(P均< 0.001);而迁移率[(10.05 ± 2.31)﹪比(23.95 ± 4.20)﹪、(36.26 ± 5.01)﹪、(53.59 ± 6.71)﹪]、N-cadherin mRNA蛋白相对表达量(0.42 ± 0.06比0.58 ± 0.07、0.80 ± 0.10、0.95 ± 0.11),N-cadherin蛋白相对表达量(0.15 ± 0.03比0.25 ± 0.04、0.74 ± 0.07、0.95 ± 0.11)、p-JNK水平 (0.14 ± 0.03比0.29 ± 0.05、0.68 ± 0.07、0.95 ± 0.10)均升高(P 均 < 0.001)。不同剂量和阴性对照组的JNK mRNA与蛋白表达差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论 DCA可抑制人肾癌细胞株A498侵袭及迁移,且一定范围内呈剂量依赖性,推测与调控侵袭及迁移相关基因与蛋白表达有关。
【关键词】 二氯乙酸; 肾癌; 侵袭; 迁移; 上皮间质转化
 
 
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【摘要】 目的 探讨二氯乙酸(DCA)对人肾癌细胞株A498侵袭及迁移的影响,并分析其机制。方法 取人肾癌细胞株A498培养,分为阴性对照 (等容积无菌生理盐水)组、DCA低、中、高 (5、10、20 mmol/L)剂量组,培养48 h。Transwell小室实验检测侵袭能力,细胞划痕实验检测迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应 (qRT-PCR)检测c-Jun氨基末端激酶 (JNK)、钙粘附蛋白E (E-cadherin)、N-钙粘蛋白 (N-cadherin)基因表达,Western blot检测蛋白表达及磷酸化JNK (p-JNK)。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果 与DCA高剂量组相比,DCA中、低剂量组、阴性对照组侵袭活性[(75.33 ± 10.09) 比 (167.89 ± 47.12)、(372.74 ± 50.06)、(530.26 ± 81.22)个/视野]、E-cadherin mRNA相对表达量 (1.52 ± 0.12比1.35 ± 0.11、1.02 ± 0.11、0.85 ± 0.12)、E-cadherin蛋白相对表达量 (1.32 ± 0.19 比0.89 ± 0.14、0.37 ± 0.08、0.13 ± 0.03)均降低(P均< 0.001);而迁移率[(10.05 ± 2.31)﹪比(23.95 ± 4.20)﹪、(36.26 ± 5.01)﹪、(53.59 ± 6.71)﹪]、N-cadherin mRNA蛋白相对表达量(0.42 ± 0.06比0.58 ± 0.07、0.80 ± 0.10、0.95 ± 0.11),N-cadherin蛋白相对表达量(0.15 ± 0.03比0.25 ± 0.04、0.74 ± 0.07、0.95 ± 0.11)、p-JNK水平 (0.14 ± 0.03比0.29 ± 0.05、0.68 ± 0.07、0.95 ± 0.10)均升高(P 均 < 0.001)。不同剂量和阴性对照组的JNK mRNA与蛋白表达差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论 DCA可抑制人肾癌细胞株A498侵袭及迁移,且一定范围内呈剂量依赖性,推测与调控侵袭及迁移相关基因与蛋白表达有关。
【关键词】 二氯乙酸; 肾癌; 侵袭; 迁移; 上皮间质转化